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一种促进澳洲坚果茎段诱导愈伤组织的方法
来源：云南林业和草原技术推广网
时间：2020-08-17 14:13:47
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专利类型：发明授权
申请(专利)号：cn201811413799.1
申请日：2018-11-26
授权公布号：cn109496849b
授权公告日：2020-07-28
申请人：
地址：562400 贵州省黔西南布依族苗族自治州兴义市下五屯峰林东路1号
发明人：; ; ; ;
分类号：a01h4/00
主分类号：a01h4/00
国省代码：52
页数：7
代理机构：贵州派腾知识产权代理有限公司
代理人：谷庆红
主权项：
1.一种促进澳洲坚果茎段诱导愈伤组织的方法,其特征在于,包括以下步骤：(1)外植体的采集：在澳洲坚果成年树生长萌芽期,用消毒过的剪刀截取枝条上健康且无病虫害带芽的茎段为外植体,茎段长5～10cm,直径0.1～0.2cm；(2)外植体预处理：将上述选好的长茎段迅速带回室内,去掉叶片,用消毒过的剪刀剪成3～4cm长段,置于干净的容器中,于自来水下流水冲洗30～60min；(3)消毒：将上述预处理后的茎段置于灭菌过的超净工作台上,采用消毒剂a处理20～40s,然后用消毒剂b处理8～12min,最后用无菌水冲洗3～5次,每次冲洗4～6min；所述消毒剂a为吐温20按照2滴/500ml的量加入到酒精中混合而成；所述消毒剂b为吐温20按照2滴/500ml的量加入到浓度为0.05～0.15％的升汞中混合而成；(4)接种：用灭菌手术剪将上述消毒过的长茎段两端各剪掉0.4～0.6cm,然后将剩余的长茎段切成长度为0.8～1.2cm的带腋芽茎段,接种到培养基；(5)培养：将上述接种后的培养基放置在无菌培养室中进行恒温暗培养,培养温度为25～28℃,湿度65～75％；所述培养基为ms 0.5～2.0mg/l6-ba, 0.1～1.0mg/lnaa, 25～35g/l蔗糖、 5～10g/l琼脂,混合后的培养基ph调节至5.8～6.0。
摘要：
本发明属于澳洲坚果栽培技术领域,尤其是一种促进澳洲坚果茎段诱导愈伤组织的方法,通过外植体的采集、外植体预处理、消毒、接种、培养共五个步骤,通过本发明方案处理,使得外植体污染率为5％以下,愈伤组织诱导率达到96％以上,能够在短期内获得愈伤组织和再生芽,愈伤组织可以作为无菌芽的诱导材料,不需要进行消毒处理,再生芽生长较快,不容易出现细胞组织坏死情况。
查看法律状态 2020-07-28 授权 授权
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